Badanie funkcji domen czynnika splicingowego AtCWC22h w oddziaływaniu białko-białko oraz roli mutacji w genie AtCWC22h w odpowiedzi Arabidopsis thaliana (L.) Heynh na stres zasolenia

Funkcjonowanie komórek eukariotycznych i prokariotycznych zależy od ściśle regulowanych molekularnych interakcji. Białka, zorganizowane w różnorodne kompleksy, odgrywają istotną rolę w niemalże wszystkich procesach komórkowych, w tym między innymi w szlakach sygnalizacyjnych roślin, umożliwiając im efektywne reagowanie na bodźce zewnętrzne i czynniki stresowe. Nasz zespół zidentyfikował potencjalny kompleks proteinowy, w którego skład wchodzą, m.in. dwa oddziałujące ze sobą czynniki splicigowe Arabidopsis thaliana - AtCWC22h i UNK1. Celem niniejszej pracy było scharakteryzowanie wspomnianej interakcji oraz zidentyfikowanie odpowiadającego za nią obszaru białka AtCWC22h oraz ocena roli tego białko w odpowiedzi roślin na stres. Analiza oddziaływań między białkami, za pomocą drożdżowego testu dwuhybrydowego oraz dwuskładnikowej komplementacji fluorescencji, pozwoliła na ustalenie, że za oddziaływanie z białkiem UNK1 odpowiedzialna jest domena MA3 oraz C- koniec białka AtCWC22h. Ocena fenotypu roślin A.thaliana z mutacją insercyjną w genie kodującym białko AtCWC22h wykazała ich mniejszą wrażliwość na stres zasolenia.

The functioning of eukaryotic and prokaryotic cells relies on strictly regulated molecular interactions. Proteins, organized into diverse complexes, play a crucial role in almost all cellular processes, including plant signaling pathways, enabling plants to effectively respond to external stimuli and stress factors. Our team has identified a potential protein complex composed of, among others, two interacting splicing factors of Arabidopsis thaliana - AtCWC22h and UNK1. The aim of this study was to characterize this interaction, identify the region of the AtCWC22h protein responsible for it, and assess the role of this protein in plant stress response. Protein-protein interaction analysis using the yeast two-hybrid system and bimolecular fluorescence complementation revealed that the MA3 domain and the C-terminal region of the AtCWC22h protein are responsible for its interaction with UNK1. Phenotypic analysis of A. thaliana plants with an insertional mutation in the gene encoding AtCWC22h demonstrated reduced sensitivity to salt stress.